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流感疫苗生產的純化過程和設備
更新時間:2011-07-11   點擊次數(shù):2752次
流感疫苗生產的純化過程:
1.       已培養(yǎng)好的帶病毒的雞胚用75%酒精消毒;
2.       收集雞胚尿囊液:根據雞蛋大小收集量略有不同(每只6-10ml);
3.       尿囊液初濾JST型10μm濾芯過濾;
4.       連續(xù)流離心機或超濾系統(tǒng)過濾
a.  連續(xù)流離心機:用12,000rpm,流量:每分鐘600-800ml,除去雜質,上清液用于透析濃縮;
b.  Millipore超濾系統(tǒng),0.45μm濾膜,除去雜質
5.       尿囊液的透析濃縮:用Millipore超濾器,1000KD膜包濃縮,濃縮后通常為尿囊液量的1/30;
6.       超速離心的病毒純化(略);
7.       福爾馬林脫毒;
8.       乙醚裂解;
9.       100KD透析脫糖;
10.   去福爾馬林;
11.   去乙醚……
12.   幾種流行病毒抗原的混合(如H1N1+H3N2+H2N2)和稀釋
13.   加入穩(wěn)定劑
14.   成品
 
離心純化需要準備的儀器和基本材料:
1.       儀器
a.  阿貝折射儀 Abbe  refractometer (測蔗糖濃度)
b.  Cole parmer 軟管泵:KH-77913-25
c.  紫外分光光度計或核酸蛋白分析儀(有280nm,260nm波長的),可以是帶流動池及記  錄儀,也可以是帶標準樣品池的)
2.       梯度液
a.        PB緩沖液PH7.3
b.       30% w/w蔗糖液(Sucrose,Sigma,AR級)
c.        55% w/w蔗糖液
d.       58% w/w蔗糖液
3.       實驗器具
a.        50ml有刻度玻璃管    100支
b.       500ml有刻度燒杯     5支
c.        100ml有刻度燒杯     5支
d.       1000ml有刻度量筒    3只

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